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什么是化学发光分析法

人阅读 发布时间:2022-10-28 11:09

《什么是化学发光分析法》
化学发光分析是利用化学发光反应的发光现象,对化学发光物质由激发态跃迁回基态时发出的光信号进行测量的一种分析方法。分子或原子中的电子吸收能量后,由基态(较低能级)跃迁到激发态(较高能级),然后再返回到基态并释放光子的过程即为发光;伴随化学反应过程所产生的光的发射现象即为化学发光。利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子(hM)。

化学发光免疫分析结合了化学发光的高灵敏度和免疫分析的高特异性,在临床检验,药物分析,环境监测等领域得到了广泛应用。
根据免疫标记物不同,化学发光分析种类大致分为以下三类:
  1. 直接化学发光免疫分析
直接化学发光,其特点是采用吖啶酯、异鲁米诺衍生物ABEI等作为示踪物质标记抗原或抗体分子形成发光标记物,采用纳米微球为固相载体的分离方式,通过碱性液诱导结合标记物发光,并通过测定发光强度实现对超微量物质的定量分析。


直接化学发光特点:不需要酶催化,直接参与反应,化学结构上有产生发光的特有基团,可直接标记抗原或抗体参与反应。

吖啶酯发光动力学特点:AE发光为闪光型,0.4s时发光强度达到最大,前2S闪光强度下降很快,此后下降比较慢,发光半衰期约为0.9s
 
  1. 酶促化学发光免疫分析
酶促化学发光免疫分析以酶蛋白标记抗原或抗体制备酶结合物,利用酶催化发光底物反应所提供的能量诱导光信号的产生,最终通过测定光学信号实现对待测物质的免疫分析,简称“酶促发光免疫分析”。常用的标记酶有:辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP),发光底物以鲁米诺和AMPPD为代表。

与酶联免疫分析相同,酶促发光免疫分析采用辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP)作为标记物,不同的是酶促发光免疫分析采用发光底物。酶促化学发光免疫分析的发光类型属于间接化学发光。

酶促化学发光-鲁米诺+HRP发光体系特点:闪光型,在发光增强剂的情况下,发光时间可持续到30-60min。
 
  1. 电化学发光免疫分析
电化学发光免疫分析是以三联吡啶钌作为示踪物质标记抗原或抗体,并采用纳米微球为固相载体的分离方式,以三丙胺作为电子供体,通过电场作用诱导结合标记物发光,通过测定发光强度实现对超微量物质的定量分析。

电化学发光免疫分析包括电化学和化学发光两个过程。

发展至今,化学发光技术凭借着可自动化、高灵敏度、无放射性污染、高特异性等特点已成为主流诊断手段。迈跃生物广泛采用各种化学发光方法,认真筛选核心原料,最大限度消除钩状效应,提升生产工艺,技术服务和工艺水平,已成为最专业的体外诊断核心原料供应商之一。
 

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